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Se connecter Site Menu services Google Scholar Services PubMed in vitro l'efficacité de Amaltas (Cassia fistula L.) contre les agents pathogènes responsables de l'otite externe Cet article Citations Article Renseignements: Auteurs: Kamal Rai Aneja Département de Microbiologie, Université Kurukshetra, Kurukshetra-136119, Haryana , Chetan Sharma Département de microbiologie, Université Kurukshetra, Kurukshetra-136119, Haryana, Inde Radhika Joshi Département de microbiologie, Université Kurukshetra, Kurukshetra-136119, Haryana, Inde Correspondance: Résumé: introduction et objectif: otite externe, communément appelée maladie de l'oreille, est caractérisé par une inflammation du conduit auditif externe. Le but de cette étude était d'évaluer le potentiel antimicrobien de Cassia fleurs de la fistule, des feuilles et des extraits d'écorce contre Staphylococcus aureus, Proteus mirabilis, Escherchia coli, Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter sp. et Candida albicans, des agents pathogènes provoquant l'otite externe et leur comparaison avec localement disponibles gouttes auriculaires. Matériels et méthodes: méthanol, l'éthanol, l'acétone, aqueux (chaud et froid) extraits des fleurs, des feuilles et de l'écorce de C. fistule ont été testés pour leur activité antimicrobienne contre six agents pathogènes de l'oreille provoquant l'otite externe déterminé par la méthode de diffusion sur gélose de puits. Résultats: fleur bio et des extraits d'écorce affichent une activité contre tous les agents pathogènes de l'oreille testés tandis que l'extrait de feuilles a montré une activité contre quatre bactéries testées et les extraits aqueux ont été incapables de présenter une activité antimicrobienne. Parmi les trois solvants organiques évalués, extrait de fleur acétonique a été jugée meilleure contre S. aureus suivie d'extrait d'écorce et de l'extrait de feuille. L'extrait de fleur acétonique a montré de plus grandes zones d'inhibition par rapport à l'oreille gouttes à base de plantes avec une concentration minimale inhibitrice (CMI) de 6,25 mg / ml. Conclusion: l'extrait acétonique de C. fleur de la fistule peut être utilisé pour traiter l'otite externe surtout causée par S. aureus. Cependant, des études plus détaillées telles que les tests in vivo et la pharmacocinétique des propriétés sont nécessaires pour déterminer son potentiel thérapeutique. Importance et impact de l'étude: En raison des effets antimicrobiens des extraits organiques Amaltas sur les agents pathogènes de l'oreille, l'utilisation de fleurs extrait acétonique dans l'oreille à base de plantes gouttes est recommandée. Mots-clés: otite externe Cassia fistula activité antimicrobienne concentration minimale inhibitrice organiques et d'extraits aqueux Manuscript corporels: otite externe se réfère à un spectre d'infections du conduit auditif externe et l'oreillette, généralement associés à une infection microbienne de la peau macérée et le tissu cellulaire sous-cutané principalement causée par Staphylococcus aureus, S. epidermidis, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter calcoaceticus, Proteus mirabilis et Candida albicans 1-3. Elle touche entre 5 et 20 des patients fréquentant les cliniques ORL. Les manifestations de l'otite externe incluent la douleur, le prurit et l'érythème, mais que la maladie progresse œdème, otorrhée et la perte d'audition conductrice peuvent aussi se développer 4,5. La prévalence croissante de souches résistantes de bactéries multirésistantes et l'apparition récente de souches ayant une sensibilité réduite aux antibiotiques soulève le spectre d'infections bactériennes incurables et ajoute urgence à la recherche de stratégies de lutte contre les nouvelles d'infection 6,7. De nombreuses maladies infectieuses ont été connus pour être traités avec des remèdes à base de plantes tout au long de l'histoire de l'humanité. Les produits naturels, soit des composés purs ou extraits de plantes comme standardisés, offrent des possibilités illimitées pour le développement de nouveaux médicaments en raison de la disponibilité inégalée de la diversité chimique 8,9. L'Inde est un emporium variétale des plantes médicinales et est l'un des pays les plus riches du monde en ce qui concerne les ressources génétiques des plantes médicinales 10. Cassia fistula L. (famille des Fabacées), communément appelé Amaltas, Golden arbre de douche et labrum indienne, un taxon de Cassia comprenant 600 espèces, est un arbre de taille moyenne ornementale croissante jusqu'à une hauteur de 10-20m avec de belles branches de fleurs jaunes. Il est la fleur nationale de la Thaïlande, mais appartient nativement à l'Asie du sud. Cette plante a une grande valeur thérapeutique comme antipyrétique, analgésique, anti-oxydant, anti-inflammatoire, hypoglycémique et a été utilisé dans le traitement de divers troubles tels que l'hématémèse, le prurit, le leucoderma, le rhumatisme, les maladies de la peau, de la tuberculose, les yeux et les affections du foie. 11-14. Diverses parties de cette plante sont connues pour constituer une source importante de métabolites secondaires, principalement des composés phénoliques tels que fistucacidin (3,4,7,8,4-pentahydroxyflavan), (-) epiafzelechin, (-) epiafzelechin-3-O-glucoside , (-) epicate-chin, procyanidine B 2, biflavonoides, triflavonoids, glucosides RHEIN, sennosides a et B, chrysophenol et physcion isolé à partir des feuilles 15,16 kaempférol, leucopélargonidine tétramère ayant une unité de glycol libre, bianthraquinone glycoside, rhein, fistulin , alcaloïdes, triterpènes des fleurs 17 et oxyanthraquinone et dihydroxyanthraquinone de la recherche écorce 18. littérature révèle la réalisation de quelques études sur l'activité antimicrobienne de diverses parties de cette plante telles que l'écorce, les gousses, feuilles et fleurs 12-14,19,20 . Cependant, des études antimicrobiennes contre les agents pathogènes de l'otite externe font défaut. Par conséquent, la présente étude a été entreprise pour évaluer le potentiel antimicrobien de diverses parties de cette plante contre les microbes isolés localement des patients otites de externa et il a été comparé à localement disponibles gouttes auriculaires. Matériel et méthodes L'écorce, les feuilles et les fleurs de C. fistule ont été recueillies à partir des arbres le long des routes de l'Université de Kurukshetra, Haryana. L'identité taxonomique de l'usine a été confirmé par le Dr Vashishta du Département de botanique, Université Kurukshetra, Kurukshetra. Extraction du matériel végétal Les échantillons ont été soigneusement lavés sous l'eau courante du robinet puis de l'eau distillée stérile et séché à l'air à 35-40C pendant 4-5 jours, homogénéisé à une poudre fine en utilisant un broyeur mélangeur stérilisé et stocké dans l'air des bouteilles serrées. Quatre solvants différents à savoir l'éthanol, le méthanol, l'acétone et aqueuse (chaud et froid) ont été utilisés pour l'extraction. A 10 g de homogénéisées écorce, les feuilles et les fleurs ont été trempée séparément dans des flacons coniques de 100 ml contenant chacune de l'acétone, de l'éthanol, du méthanol (95) ou de l'eau distillée stérile. De plus, le montant égal (c.-à-10g) de l'écorce homogénéisé et les feuilles ont été immergés séparément dans 100 ml d'eau stérile distillée chaude dans des flacons coniques et on laisse reposer pendant 30 min dans un bain d'eau (à 100C dans des flacons stériles étiquetés jusqu'à utilisation ultérieure 23. Cinq bactéries à savoir S. aureus (HM626197), Acinetobacter sp. (HM626198), P. mirabilis (HM626199), E. coli (HM626200), P. aeruginosa (HM626201) et une levure C. albicans. on a isolé des patients ayant une oreille l'infection des cliniques locales de ORL Kurukshetra 24. les souches bactériennes ont été identifiées sur la base de la coloration de Gram, biochimiques et les caractéristiques moléculaires (16S ARNr de séquençage) et sur la base de la coloration, la morphologie et les caractéristiques culturelles pour la levure 25,26. le bactérien isolats ont été repiquées sur gélose nutritive et la levure sur gélose Malt de levure et incubées en aérobiose à 37 ° C. les médias ont été achetés auprès de Salut media Laboratory Pvt. Ltd. Bombay, en Inde. (séquence nucléotidique de tous les cinq bactéries ont été soumises à la base de données GenBank, qui ont fourni GenBank numéro d'accession, HM626197-HM626201). Trois oreille couramment prescrit gouttes par otolaryngologists, deux Ciplox allopathique (antibactériens), franche (antifongiques), une chute de l'oreille à base de plantes Bilwa tel (antimicrobien), ont été achetés sur le marché local en Kurukshetra. Le dépistage de l'activité anti-microbienne dans l'acétone, le méthanol, l'éthanol, aqueux C. feuilles chaudes et froides de la fistule, l'écorce et les extraits de fleurs ont été utilisées pour l'évaluation de l'activité anti-microbienne par la méthode de diffusion en puits de gélose. Dans ce procédé, un isolat pur de chaque microbe a été cultivée sur des plaques de gélose à 37 ° C pendant 24 h. Une plaque de chaque micro-organisme a été prélevé et un minimum de quatre colonies ont été transférées dans une solution saline normale (0,85) dans des conditions aseptiques. Densité de chaque suspension microbienne a été ajustée égale à celle de 10 6 ufc / ml (normalisé par 0.5McFarland standard) et utilisés comme inoculum pour la réalisation d'agar test de diffusion de puits. Une centaine de microlitres (volume de 100 ul de chaque extrait a été propulsé directement dans les puits (en triple exemplaire) des plaques d'agar inoculées pour chaque organisme d'essai. Les plaques ont été laissées au repos pendant 1 heure à 40 écarts-types ont été calculés. Détermination de la concentration minimale inhibitrice minimale la concentration inhibitrice (CMI) pour chaque organisme d'essai a été déterminée par la modification de la gélose méthode de diffusion en puits. Une dilution en série double de chaque extrait a été préparé en premier reconstituant l'extrait séché (100 mg / ml) dans 20 du DMSO suivi par une dilution dans de l'eau distillée stérile à obtenir une plage de concentration décroissant de 50 mg / ml à 0.39mg / ml. a 100 ul d'inoculum standardisé (10 6 ufc / ml) de la souche microbienne d'essai. les plaques d'essai ont été incubées en aérobiose à 37 ° C pendant 24 heures et on a observé des zones d'inhibition . MIC, pris comme la plus faible concentration de l'extrait de test qui a complètement inhibé la croissance du microbe, montré par une zone claire d'inhibition (12mm), a été enregistrée pour chaque organisme d'essai 23,24. L'activité antimicrobienne de la fistule C. écorce, les feuilles et les fleurs extrait sur les plaques d'agar ont varié dans différents solvants organiques (méthanol, éthanol et acétone). Les contrôles positifs produits des zones d'inhibition de taille significative contre les bactéries testées (variant entre 11.6mm et 56.3mm) et la levure (avec zone d'inhibition 21.3mm), et le contrôle négatif produit aucun effet inhibiteur observable contre tout de l'organisme d'essai (tableaux 1 et 2). Une lecture attentive des données du tableau 1 révèle que tous les extraits de deux fleurs et l'écorce de solvants organiques possèdent une activité antimicrobienne contre les six agents pathogènes de l'oreille testés tandis que les extraits de feuilles organiques ne présentent aucune activité contre P. aeruginosa et C. albicans. Des extraits aqueux, à la fois chaudes et froides de l'écorce, des feuilles et des fleurs de C. fistule. manquait totalement une activité antimicrobienne. L'extrait de fleurs acétonique a été trouvé plus efficace contre S. aureus (24.6mm), suivie par P. mirabilis (18.6mm), Acinetobacter sp. P. aeruginosa (17.6mm), E. coli (16.6mm) et C. albicans (15.3mm). Les extraits de fleurs éthanoliques et méthanoliques ont montré des zones d'inhibition de 18.3mm et 20.6mm contre S. aureus. Les zones d'inhibition produit par l'extrait de fleur éthanolique et méthanolique contre les autres agents pathogènes testés étaient presque égaux et ont varié entre 15mm et 17mm. S. aureus a été trouvé pathogène le plus sensible ayant une CMI de 6,25 mg / ml. D'autres agents pathogènes testés se sont avérés être moins sensibles, présentant des valeurs de CMI entre 25 mg / ml et 50 mg / ml (Tableaux 1 et 3). Sa, Staphylococcus aureus Ac, Acinetobacter Sp. Pa, Pseudomonas aeruginosa Pm, Proteus mirabilis Ec, Escherchia coli Ca, Candida albicans Fe, extrait de fleur Be, extrait d'écorce de Le, extrait de feuilles. Les trois extraits d'écorce organiques ont montré leur plus forte activité antibactérienne contre S. aureus avec zone d'inhibition de 22.6mm pour l'extrait acétonique suivi de l'extrait éthanolique (de 20.6mm) et extrait méthanolique (de 19,3 mm). S. aureus a été à nouveau trouvé que le pathogène le plus sensible, ayant une CMI de 12,5 mg / ml (extrait d'écorce acétonique) suivi du méthanolique extraits éthanoliques et 25 mg / ml. extraits d'écorce organiques ont montré une activité modérée contre P. mirabilis, Acitenobacter sp. et C. albicans avec des zones d'inhibition comprises entre 16.6mm et 18mm et MIC de 50mg / ml. Les zones d'inhibition produites par les solvants organiques contre P. aeruginosa et E. coli ont varié entre 13.6mm et 14.3mm et ces deux bactéries se sont révélées être moins sensible ayant une CMI de 100 mg / ml (Tableaux 1 et 3). Dans le cas des extraits de feuilles de C. fistule, S. aureus a été révélée être la plus active des quatre agents pathogènes bactériens qui ont montré la sensibilité à des extraits organiques avec une zone d'inhibition comprise entre 17,6 mm et 18,6 mm et ayant une CMI de 25 mg / ml. La zone d'inhibition produite contre les trois autres bactéries était presque égal et se situait entre 12.3mm et 13.6mm et ayant une CMI de 100mg / ml (tableaux 1 et 3). Cependant, des extraits de feuilles organiques manquaient activité antimicrobienne contre P. aeruginosa et C. albicans. Toutes les fleurs organiques et des extraits d'écorce présentaient une activité beaucoup plus élevée contre les agents pathogènes de l'oreille testés (avec la plus grande zone d'inhibition de 24.6mm) par rapport à la chute de l'oreille à base de plantes ayurvédiques, Bilwa tel. Cependant, allopathique antibactérien Ciplox de gouttes auriculaires, contenant la ciprofloxacine et la chute de l'oreille antifongique, franche, contenant clotrimazole, a montré une plus grande activité inhibitrice contre les agents pathogènes de l'oreille (avec la plus grande zone d'inhibition de 56mm et 21mm, respectivement) (tableaux 1 et 2). Cassia fistule a été largement utilisée dans diverses parties du monde contre un large éventail de maladies 11. Le potentiel antimicrobien de cette plante extraite dans différents solvants (par exemple aqueux, l'éther diéthylique, l'acétate d'éthyle, le dichlorométhane, le méthanol, l'éthanol et de chloroforme) a été évalué contre différents agents pathogènes humains bactériennes et fongiques et des activités variables de différentes parties de la plante, y compris les fleurs, les feuilles, les gousses, les graines, écorce de la tige dans différents solvants a été rapporté 12,13,20,27. La majorité des effets antimicrobiens décrits de C. extraits de la fistule ont été attribués à leurs métabolites secondaires, notamment des composés phénoliques 11. Notre rapport est le premier de l'activité antimicrobienne de cette plante contre les agents pathogènes de l'oreille provoquant l'otite externe. Dans notre étude, les fleurs organiques extraits de C. fistule se sont révélés être les plus actifs dans l'inhibition de la croissance de tous les six testés pathogènes d'oreille microbiennes provoquant l'otite externe suivie par les extraits d'écorce. L'activité antimicrobienne des fleurs extraits contre les agents pathogènes de l'oreille testés peut être due à la présence de métabolites secondaires, kaempférol, leucopélargonidine tétramère avec unité de glycol libre, bianthraquinone glycoside, fistulin, alcaloïdes et triterpènes 17,28. l'hydrate d'acide récemment 4-hydroxybenzoïque isolé à partir des extraits de fleurs d'acétate d'éthyle de cette plante, a été trouvé avoir une activité antimold, mais pas antibactérien ou l'activité des levures anti - 12. Les extraits méthanoliques des semences et des extraits aqueux de gousses de C. fistule ont été jugée non toxique pour les humains 29,30. Sangetha et al. 13 ont rapporté l'activité antimicrobienne supérieure de l'extrait méthanolique de tiges suivie par les fleurs, les gousses et les feuilles de cette plante. Parmi les microorganismes testés, S. aureus a été constaté que l'oreille pathogène le plus sensible contre les extraits organiques testés. Et Jigna Sumitrâ 31 ont également signalé la présence d'une activité plus forte des extraits de plantes contre des bactéries Gram-positives que celle des bactéries Gram-négatives. Sur les neuf extraits organiques de trois parties de ces plantes criblées, l'extrait acétonique a été trouvé pour être plus actifs et ont une meilleure activité antibactérienne que les extraits éthanoliques et méthanoliques correspondants (tableau 1). Nos résultats confirment les conclusions rendues par Cowan 32, Eloff 33, Nair et al. 34, qui ont qualifié l'acétone comme le meilleur solvant. Tous les trois extraits aqueux de cette plante manquait antifongique et une activité antibactérienne contre les agents pathogènes de l'oreille testés. Polarité de composés antimicrobiens qui les rendent plus facilement extractible dans les solvants organiques et des quantités insuffisantes de la substance active dans l'extrait aqueux brut avec le niveau de dose utilisée peut être les raisons de l'absence de bioactivité de l'extrait aqueux 13,20,23. Fait intéressant, les extraits organiques ont été plus puissante contre les agents pathogènes de l'oreille testés par rapport à la chute de l'oreille à base de plantes standard (Bilwa tel) montrant un grand potentiel pour être développé comme une goutte d'oreille à base de plantes pour contrôler les infections de l'oreille microbiens. Nos résultats montrent que les extraits acétoniques de C. fistule ont la meilleure bioactivité contre les six testés pathogènes microbiens d'oreille provoquant l'otite externe. Cette constatation donne un aperçu de l'utilisation de cette plante comme une médecine traditionnelle pour guérir différents maux depuis des générations. Nous tenons à remercier le Dr BD. Vashishta, Département de botanique, Université Kurukshetra, Kurukshetra, pour déchirer l'aide dans la confirmation de l'identification de la plante. Conflit d'intérêt: Tous les auteurs déclarent avoir aucun conflit d'intérêts. Sources de financement: Université Kurukshetra, Kurukshetra, Inde. Références: (34)
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